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≪Ｐromega≫ プロメガメールマガジン ≪06-2010号≫

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▲ NEWS ▲

1） 新製品情報

          ・Renilla-Glo™ Luciferase Assay System

2） HaloTag最新情報

・お勧めアプリケーション

・最新論文情報

・HaloTagウェブページ

3） かずさORFクローンについて

4) オンラインプロメガ技術情報

・Promega Publications Portal ：『PubHub』

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□■■新製品情報■■□

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-ウミシイタケルシフェラーゼ測定試薬にグロータイプが新登場 -

◆ Renilla-Glo™ Luciferase Assay System ◆

大好評のルシフェラーゼテクノロジー試薬のラインナップが更に充実しました。

ウミシイタケルシフェラーゼ活性を測定する試薬にグロータイプが新登場！

【特長】

・添加-測定だけのシンプルなウミシイタケレポーターアッセイ

・高強度・長時間発光（例: 22℃、60分以上の半減期）

・ホタルルシフェラーゼと比べると・・

・サイズが小さい (Renilla: 36 kD, Firefly: 61 kD)

・非ATP要求性

などの特長があります。

＊製品詳細は、下記をご覧ください。↓

http://www.promega.co.jp/Cre_Html.php?pGMPID=100841

プロメガでは、さまざまな用途に合わせた試薬をご用意しております。

研究にあったルシフェラーゼ測定試薬を選択可能です！

http://www.promega.co.jp/cat/contents_10.html

最新ルシフェラーゼベクターpGL4 vectorは、

下記をご覧ください。

http://www.promega.co.jp/cat/pGL4_vectors.html

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□■■HaloTag最新情報■■□

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HaloTag、ご存知ですか？

話には聞いたことがあるけど・・という方も多いことと思います。

最近、かなり多くの方にご利用いただけるようになりました。

そこで、実際にご利用いただいている方々がどのような実験に使用しているか

論文情報と共にご紹介させていただきます。

○○お勧めアプリケーション○○

・パルスチェイス実験

一般的には、RI法でおこなわれている実験系ですが、

Non-RI法で安全・簡便にできるのが、HaloTagテクノロジーです。

HaloTagを利用することで、検出したい特定の時期に発現しているタンパク質だけを

染め分けることができます。

そのため、刺激をした後に発現したタンパク質だけを染めたい時や

ある一定の期間に発現したタンパク質を検出したい時にもご利用いただけます。

また、細胞非透過リガンドもご用意しているため、膜タンパク質も染め分けられます。

未標識リガンドやビオチンリガンドをブロッキングリガンドとして使用することで

パルスチェイスを効率良く行っている例も多数あります。

是非論文情報をご覧ください。

http://www.promega.com/citations/default.aspx?citapp=halotag

・ゲル内分析

リガンドと共有結合するHaloTagの特長から

SDS-PAGE→蛍光イメージャーで、すぐに確認可能です。

発現確認が容易なだけでなく、タンパク質分解過程も定量的に検出することも可能です。

○○最新論文情報○○

続々とHaloTag製品を利用した研究論文が出ています。

その中で最新の論文をご紹介いたします。

▼パルスチェイス▼

Proteomic identification of sorting nexin 6 as a negative regulator of BACE1-mediated APP processing

Hirokazu Okada, Wenzhu Zhang, Corrinne Peterhoff, Jeremy C. Hwang, Ralph A. Nixon, Sung H. Ryu, and Tae-Wan Kim

FASEB J. published Mar 30, 2010,

要約：

この論文では、アルツハイマーの関連タンパク質であるβアミロイド前駆体（APP)からβペプチドを生成するのに

関与するβ-site APP Cleaving enzyme-1(BACE1)に、sorting nexin 6(SNX6)が結合することを見出しました。

論文では、SNX6をノックダウンしてもBACE1のターンオーバーレート、発現量が変化しないことをBACE1-HaloTag

タンパク質を使ったパルスチェイスの実験で証明しています。

▼DNA-タンパク質相互作用▼

SOX9 is a major negative regulator of cartilage vascularization, bone marrow formation and endochondral ossification.

Hattori, T., Müller, C., Gebhard, S., Bauer, E., Pausch, F., Schlund, B., Bösl, M.R., Hess, A., Surmann-Schmitt, C.,

von der Mark, H., de Crombrugghe, B. and von der Mark, K. (2010) Development 137 , 901-11

要約：

クロマチン免疫沈降法に代わるHaloCHIP™ System（カタログ番号G9410)を使って、SOX9がVEGFa遺伝子の

SRYサイトに結合することを示している。

▼原子間力顕微鏡▼

Application of HaloTag protein to covalent immobilization of recombinant proteins for single molecule force spectroscopy

Y. Taniguchi and M. Kawakami，Langmuir ，in press.，2010

要約：

原子間力顕微鏡を使ってタンパク質の1分子解析を行っています。

この論文では、HaloTagをmica表面に固定化して1分子タンパク質の粘弾性を計測し、目的のタンパク質の高次構造を解析しています。

論文では、HaloTagを使ってタンパク質を固定化する方法がこの分野の研究に役に立つとご紹介していただいています。

○○○HaloTag ウェブページ○○○

初めてHaloTagを使用される方の為の初めてガイドや、プレゼンテーション等を

ご覧いただけます。

ぜひこの機会にHaloTagの魅力を感じてください。↓

http://www.promega.co.jp/halotag/index.html

初めて導入を検討される方は、『HaloTagスターターガイド』をご覧ください↓

http://www.promega.co.jp/halotag/HaloTag_Tech01.pdf

技術的なご相談は、テクニカルサービス部まで

Tel: 03-3669-7980

E-mail: prometec@jp.promega.com

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□■■ かずさORFクローン■■□

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販売開始以来、非常にご好評いただいているかずさORFクローン、

もうご利用いただいていますか？

弊社のFlexiシステムに加え、大変好評なのがHaloTagORFクローンです。

タンパク質発現・機能解析に便利なHaloTagシステム、そのHaloTag®発現ベクターに

ご希望の遺伝子がクローニング済み、かつ発現確認済みですので、すぐにお使いいただけます。

○注文方法： ＜Web上でご注文・お見積り依頼をしてください。＞

・FlexiクローンとHaloTagクローン

下記のデータベースよりご希望のクローンを検索してください。

http://www.kazusa.or.jp/kop/dsearch/

↓

ご希望のクローンのProductIDをカートに入れ手順に従って注文・お見積りを

お申込みください。

見積クローン以外は、カート上で価格を確認することができます。

※詳しいご注文方法は、下記をご覧ください。

http://www.promega.co.jp/flexicloning/order_explanation.html

・オリジナルクローン

下記の注文フォームから、上記データベースに記載しているProductID番号、

基本情報をご記入の上、下記よりご注文ください。

http://www.promega.co.jp/flexicloning/order.html

○納期について

標準型：原則2週間以内

M型クローン：1ヶ月以上

E型クローン：1ヶ月以上

※詳しい納期は、お問い合わせください。

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□■■ オンライン技術情報■■□

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プロメガの最新技術情報は、Promega Publications portal： 『PubHub』から

ご覧いただけます。

随時アップデートされますので、是非チェックしてみてください。

◆Promega Publications portal： 『PubHub』◆

http://www.promega.com/pubs/default.htm